提高
生物樣品掃描電鏡圖像質(zhì)量的技巧
一、樣品制備
1、清潔樣品：確保樣品表面無(wú)油污、灰塵或污染物。可以使用氣體吹掃、超聲波清洗或化學(xué)清洗等方法。
2、固定與脫水：使用化學(xué)試劑如戊二醛或甲醛固定生物樣品，以保持其結(jié)構(gòu)完整。然后通過(guò)梯度脫水處理，通常使用乙醇或丙酮。
3、干燥處理：選擇適當(dāng)?shù)母稍锓椒?，如冷凍干燥或臨界點(diǎn)干燥，以避免樣品結(jié)構(gòu)的破壞。
4、導(dǎo)電涂層：對(duì)于非導(dǎo)電樣品，施加導(dǎo)電涂層（如金、鉑或碳涂層）以防止電荷積累，提高圖像的穩(wěn)定性和對(duì)比度。
二、設(shè)備設(shè)置與操作
1、選擇合適的加速電壓：根據(jù)樣品的導(dǎo)電性和觀測(cè)目的選擇合適的加速電壓。較低的加速電壓適合觀察樣品表面細(xì)節(jié)。
2、調(diào)整電子束強(qiáng)度：適當(dāng)降低電子束強(qiáng)度以減少樣品損傷，避免過(guò)度照射引起的圖像失真。
3、優(yōu)化工作距離：較短的工作距離通常可以獲得更高的分辨率，但需要根據(jù)樣品的幾何形狀進(jìn)行調(diào)整。
4、消除像散：在高倍率成像時(shí)，確保消除像散以避免圖像變形。
三、圖像采集與處理
1、聚焦與合軸：在低倍率下進(jìn)行粗調(diào)和精調(diào)聚焦，然后逐步提高放大倍數(shù)并進(jìn)行進(jìn)一步的調(diào)整。
2、選擇合適的檢測(cè)模式：根據(jù)分析目的選擇合適的檢測(cè)模式，如二次電子成像（SEI）用于觀察表面形貌。
3、圖像后處理：使用圖像處理軟件進(jìn)行對(duì)比度增強(qiáng)、噪聲降低和銳化處理，以改善圖像質(zhì)量。
4、圖像標(biāo)注與記錄：在圖像上標(biāo)注必要的參數(shù)信息，如放大倍數(shù)、工作距離、探測(cè)器類(lèi)型等。
通過(guò)以上技巧，可以顯著提高生物樣品掃描電鏡的圖像質(zhì)量，使其更清晰、更準(zhǔn)確地反映樣品的微觀結(jié)構(gòu)和特征。
